牛血清白蛋白抗原蛋白
封闭是WesternBlot的重要组成部分，因此正确的封闭液选择可以使抗原与抗原更加特殊地融合，为WB的成功奠定基础。
1、脱脂奶粉
脱脂奶粉是最划算的，最好买封闭剂。一般封闭液浓度为5-5%（w/v）。
2、牛血清白蛋白(BSA)
在牛血清中纯化后，牛血清白蛋白是一种球蛋白，通常有BSA封闭液浓度为2-5%。（w/v）。
3、全血清
全血清是胎牛血清、兔血清、奶羊血清等多种蛋白质混合物，也可作为封闭剂使用。通常使用的浓度是5-10%（w/v）。
elisa提蛋白质
它是一种培养液，但也有细胞分泌的可溶性蛋白质。因此，每个人通常都必须离心，然后在制作elisa之前去除一些大分子杂质。elisa检测细胞上清液总细胞因子的实验步骤:
1、提取细胞培养500ul上清液；
2、6000rpm离心54度－10min；
3、取上清。如果是细胞分泌的蛋白质，直接从培养皿中加入一定量的细胞，塑造3天。当细胞达到80-90%时，扣除细胞培养上清液，去除离心沉积，取上清测量浓度进行ELISA检测。对照组是一种新鲜的培养液。
elisa活力测试目地蛋白质
elisa的原理和流程如下：抗原或抗原吸附固相载体表面，并保持其免疫活性；
抗原或抗原与酶融合产生酶标抗原或抗原，保持其免疫活性和酶催化活性。在测量过程中，固相载体中的抗原抗体复合物通过一定的过程与固相抗原或抗原反映，并通过清洗将其与其他物质分离。
添加酶的底部物质，酶催化底部物质形成有色物质，有色物质的量与样品中待测抗体或抗原的量呈一定比例。有色物质的质量可以根据判断或定量来确定，样品中被测物质的成分可以确定。
定量ELISA蛋白
WB和ELISA的敏感度是不同的。虽然前者使用ECL的着色敏感度可以达到pg级，但不同的试验来源和抗体质量并不能保证每次都达到这个水平；而ELISA可以达到ng级别。换言之，ELISA更适合低蛋白的丰度检测。而且由于ELISA检测中使用的试验产品较少，也适用于蛋白浓度检测，试验产品来源有限。
ELISA一般用于定量方面的判断，定量也可以，WB可以达到半定量。
ELISA没有WB那么优秀。
血清elisa稀释
在elisa试剂盒试验中，关闭液小常识 ELISA的试剂盒显示，用蔗糖溶液封闭液，通常用BSA或酪蛋白的蛋白质分子封闭空缺点，蔗糖封闭原理：
1、在ELISA实验中，蔗糖本身没有封闭作用；
2、BSA通常是封闭液、芝士蛋白等或Tween等。
3、其主要目的是维持ELISA板材吸附(包被)蛋白质，具有“保护膜”的功效。
4、蔗糖溶液通常在ELISA木板通过BSA密封后添加，但也有将蔗糖添加到密封液中同步解决的情况；那种更强的要求你在实验后进行认证。但是大部分选择前者。封闭剂也可以使用5%的脱脂乳液(市场上可以销售)和0.4%的明胶，但实验表明，前者更好，后者不易清洗未融合的明胶。密封剂的原理是用密封剂密封与酶联板上未融合抗原或抗体的微孔，这样在融合抗原或抗原时就不会造成非特殊融合，也不会影响实验的准确性。Tween的作用：虽然不能独立封闭，但是与BSA在封闭时会有清洁非特异性结合或者融合不稳定的蛋白质的作用，如果抗原包在板上会有YY-配件：ELISA实验中配备缓冲溶液等试剂，ELISA实验中应以抗原和抗体的免疫反应为载体，如何配置ELISA试剂和各种溶液？最近刚刚进行了ELISA试验，将各种ELISA配置方法总结如下：(1)ELISA试验包被缓冲液(2)ELISA试验清洗缓冲液(2)ELISA试验清洗缓冲液(3)ELISA试验稀释液；(4)ELISA试验停止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)应用液(7)ELISA试验ABTS应用液(8)ELISC。ELISA试验包试剂(1)缓冲液:ELISA试验清洗缓冲液(PH7).4PBS)：·.2克Tween-200.05%0.5ml加蒸溜水到1000ml(3)ELISA试验稀释剂：牛血清白蛋白(BSA)0.1克加清洗缓冲液至100ml或羊血清、兔血清等血清与清洗液配5。～10%应用。ELISA试验停止液(2MH2SO4)：蒸溜水173ml，每次添加硫酸(98%)27ml。ELISA试验停止液(2MH2SO4)：蒸溜水173ml，每次添加硫酸(98%)27ml。ELISA底物缓冲液(PH5).0磷酸枣柠檬酸):24克//22MNa2HPO4L)(12克/L)加蒸溜水23ml50ml。ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)应用液：TMB0.5ml底物缓冲液(PH55mg/5ml无水乙醇).H2232310ml0.75%μlELISA测试ABTS应用液：ABTS0.5mg底物缓冲液(PH5).H22221ml3%μlELISA试验封闭液：牛血清白蛋白(BSA)5克加清洗缓冲液至100ml。值得注意的是，有些封闭液中含有脱脂奶粉，不宜长期保存。生物帮推荐ELISA产品类别，详情请参阅：封闭试剂，停止溶液，封闭肽，ELISA稀释剂，ELISA试剂盒，ELISA缓冲剂，ELISA洗脱缓冲剂，为了保证ELISA试验的准确性，在实验过程中必须准确添加缓冲剂和各种成分，在清洗液中添加酶标板时，避免添加的试剂渗入另一个酶标孔，防止交叉污染。试剂盒ELISA 上海恒远物科技有限公司起源于前沿酶联免疫技术，包括国内外专家的经验和智慧。试剂盒ELISA 上海恒远物科技有限公司起源于前沿的酶联免疫技术，包括国内外专家的经验和智慧。采用先进的技术和设备，在保证质量的同时，控制成本，为更多有需要的研究人员节省实验资金，保证实验质量，为国家科技发展做出更多贡献。多个生物研究基地合作伙伴，实力团队致力于打造elisa试剂盒生产、研发，助推您的科研实验！
elisa法测量蛋白质
用于检测不明抗原的双抗原夹心方法：
包被：～10μg/ml。将0.11添加到每个聚苯乙烯板反应孔中ml，4℃停留。第二天，放弃孔中溶液，用清洗缓冲液洗3次，每次3分钟。(通称清洗，相同)。
加样:在上述已包裹的反射孔中加入一定稀释的待检试品0.1ml，放入37℃孵化1小时。然后清洗。(同时做空缺孔、阴对照孔、阳对照孔)。
添加酶标抗原：在每个反射孔中，添加新鲜稀释的酶标抗原(滴定后稀释)0.1ml。37℃孵育0.5～清洗1小时。
加底液着色：在各反映孔中加入临时配制的TMB底液0.ml，37℃10～30分钟。
停止反应：在每个反应孔中加入2M盐酸0.05ml。
结论判断:在白色背景下，可以立即用肉眼观察结论:反映孔内色调越重，阳性水平越高，阴性反应无色或极浅。根据色调的浓度，“ ”、“-”号表示。还可以测量O·D值：在ELISA检查仪上，在450nm(如果使用ABTS着色，则为410nm)处，用空白对照孔调整后测量每个孔的O·D值，如果超过规定的阴性对照OD值的1倍，则为阳性。
方法二用于检测不明抗体的间接方法：
用缓冲液将已知的抗原稀释到1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃留宿。第二天清洗3次。加入一定稀释的待检试品(不明抗原)0.1ml在上述已包裹的反射孔内，放入37℃孵化1小时，清洗干净。(同时进行空缺、阴性和阳性孔对比)在反射孔中加入新鲜稀释的酶标第二抗原(抗原)0.1ml，37℃孵化30-60分钟，清洗，最后一次用DDW清洗。其它流程与“双抗原夹心法”相同。、5、6。
牛血清白蛋白对免疫结论的影响
假使牛蹄颜色很白，说明这种牛蹄筋是用药水泡过的。
买牛筋的时候要仔细鉴别。不要买碱性的钢筋。水发的钢筋更好。水发的钢筋略呈淡黄色，触感粘稠。强酸发的钢筋颜色为白色，体积明显略大。
