β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶——检查项目的不适宜人群：
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β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶——检查项目的注意细节：
(1)对硝基酚比色法：
①基质对硝基酚应纯化，配制前置50℃烘24h。用10mmol/LNaOH配成0.04mmol/L浓度，用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线，λmax=401nm，根据IFCC标准，Aλmax=0.7316～0.7388，Eλmax=18380±90(25℃)。
②底物溶解度小，配制时应先用适量pH4.6缓冲液调成糊状，再逐渐加缓冲液至所需量。
③测定结果超线性范围时，应将标本用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
④尿酶浓度受尿量影响较大，应留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值计算酶排出率，即不受尿浓缩或稀释的影响，又不需留24h尿。
(2)荧光光度法：
①荧光法测NAG已有国产试剂盒，其敏感度高，不受尿色干扰。
②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计，激发滤光片360，发射滤光片用(400+450)复合，效果满意。
③本法酶反应液中各成分浓度为：底物1.33mmol/L，枸橼酸20mmol/L，Na2HPO432mmol/L。
④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水，底物应无游离4-MU，BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。
⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天，-20℃可稳定数月。尿标本4℃稳定1周，也可用枸橼酸盐抗凝血浆。
⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解，一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30)，另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC3.2.1.52)，只有对提纯的酶才能限定EC3.2.1.30或EC3.2.1.52。目前国内文献中常称的NAG，严格地说是按所用底物命名的，而不是指酶对底物的特异性。所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶——检查项目的一般步骤：
（1)对硝基酚比色法混合，在405nm波长，1cm光径，蒸馏水调零，读取各管吸光度，用(AU-AC)之差查标准曲线。
①基质对硝基酚应纯化，配制前置50℃烘24h。用10mmol/LNaOH配成0.04mmol/L浓度，用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线，λmax=401nm，根据IFCC标准，Aλmax=0.7316～0.7388，Eλmax=18380±90(25℃)。根据对硝基酚的摩尔吸光系数
②底物溶解度小，配制时应先用适量pH4.6缓冲液调成糊状，再逐渐加缓冲液至所需量。
③测定结果超线性范围时，应将标本用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
④尿酶浓度受尿量影响较大，应留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值计算酶排出率，即不受尿浓缩或稀释的影响，又不需留24h尿。
(2)荧光光度法：先将血清或尿用不含牛血清白蛋白(BSA)的缓冲液作20倍稀释，
混匀，激发波长364nm，发射波长448nm，以终止液调零，6μmol/L4-MU管调荧光强度至100后，分别测空白管及测定管的荧光强度。
①荧光法测NAG已有国产试剂盒，其敏感度高，不受尿色干扰。
②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计，激发滤光片360，发射滤光片用(400450)复合，效果满意。
③本法酶反应液中各成分浓度为：底物1.33mmol/L，枸橼酸20mmol/L，Na2HPO432mmol/L。
④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水，底物应无游离4-MU，BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。
⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天，-20℃可稳定数月。尿标本4℃稳定1周，也可用枸橼酸盐抗凝血浆。
⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解，一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30)，另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC3.2.1.52)，只有对提纯的酶才能限定EC3.2.1.30或EC3.2.1.52。目前国内文献中常称的NAG，严格地说是按所用底物命名的，而不是指酶对底物的特异性。所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶——检查项目结果解读：
（1)对硝基酚比色法混合，在405nm波长，1cm光径，蒸馏水调零，读取各管吸光度，用(AU-AC)之差查标准曲线。
①基质对硝基酚应纯化，配制前置50℃烘24h。用10mmol/LNaOH配成0.04mmol/L浓度，用窄带宽分光光度计扫描吸收曲线，λmax=401nm，根据IFCC标准，Aλmax=0.7316～0.7388，Eλmax=18380±90(25℃)。根据对硝基酚的摩尔吸光系数
②底物溶解度小，配制时应先用适量pH4.6缓冲液调成糊状，再逐渐加缓冲液至所需量。
③测定结果超线性范围时，应将标本用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
④尿酶浓度受尿量影响较大，应留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值计算酶排出率，即不受尿浓缩或稀释的影响，又不需留24h尿。
(2)荧光光度法：先将血清或尿用不含牛血清白蛋白(BSA)的缓冲液作20倍稀释，
混匀，激发波长364nm，发射波长448nm，以终止液调零，6μmol/L4-MU管调荧光强度至100后，分别测空白管及测定管的荧光强度。
①荧光法测NAG已有国产试剂盒，其敏感度高，不受尿色干扰。
②也可用上海第三分析仪器厂产930荧光光度计，激发滤光片360，发射滤光片用(400450)复合，效果满意。
③本法酶反应液中各成分浓度为：底物1.33mmol/L，枸橼酸20mmol/L，Na2HPO432mmol/L。
④配试剂所用溶剂应用重蒸馏水，底物应无游离4-MU，BSA中应无该酶或用50℃加热2h灭活。
⑤血清中NAG于4℃稳定数小时至数天，-20℃可稳定数月。尿标本4℃稳定1周，也可用枸橼酸盐抗凝血浆。
⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二种酶催化水解，一种是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30)，另一种是β-N-乙酰已糖苷酶(EC3.2.1.52)，只有对提纯的酶才能限定EC3.2.1.30或EC3.2.1.52。目前国内文献中常称的NAG，严格地说是按所用底物命名的，而不是指酶对底物的特异性。所以目前国外文献常泛称β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
